Cytotoxicity evaluation of haloperidol, clozapine and a new molecule with antipsychotic potential, PT-31, in NIH-3T3 cells

Abstract Schizophrenia is an illness that affects 26 million people worldwide. However, conventional antipsychotics present side effects and toxicity, highlighting the need for new antipsychotics. We aimed to evaluate the cytotoxicity of haloperidol (HAL), clozapine (CLO), and a new molecule with antipsychotic potential, PT-31, in NIH-3T3 cells. The neutral red uptake assay and the MTT assay were performed to evaluate cell viability and mitochondrial activity, morphological changes were assessed, and intracellular reactive oxygen species (ROS) detection was performed. HAL and CLO (0.1 µM) showed a decrease in cell viability in the neutral red uptake assay and in the MTT assay. In addition, cell detachment, content decrease, rounding and cell death were also observed at 0.1 µM for both antipsychotics. An increase in ROS was observed for HAL (0.001, 0.01 and 1 µM) and CLO (0.01 and 1 µM). PT-31 did not alter cell viability in any of the assays, although it increased ROS at 0.01 and 1 µM. HAL and CLO present cytotoxicity at 0.1 µM, possibly through apoptosis and necrosis. In contrast, PT-31 does not present cytotoxicity to NIH-3T3 cells. Further studies must be performed for a better understanding of these mechanisms and the potential risk of conventional antipsychotics

In vitro cytotoxic and genotoxic effects of Cissus verticillata and Sphagneticola trilobata used for treatment of Diabetes Mellitus in Brazilian folk medicine

Cissus verticillata and Sphagneticola trilobata have been used in Brazilian folk medicine for Diabetes Mellitus treatment, although their pharmacological and toxicological profile has not been clearly established. Thus, the aim of this study was to evaluate the preclinical toxicity of the aqueous extracts of C. verticillata and S. trilobata. The main groups of secondary metabolites were investigated, and the species differed by the presence of coumarins in C. verticillata and by tannins in S. trilobata extracts. The highest contents of phenolic compounds and flavonoids were quantified in C. verticillata infusion with 2.594 ± 0.04 mg equivalents of gallic acid g-1 of extract and 1.301 ± 0.015 mg equivalents of catechin g-1 of extract, respectively. While the extract of S. trilobata showed minimum values of these compounds, with 0.002 ± 0.001 mg equivalents of gallic acid g-1 extract and 0.005 ± 0.0004 mg equivalents of catechin g-1 of extract, respectively. These differences implied the results of in vitro antioxidant activity evaluated using ferric reducing antioxidant power (FRAP), in which the sample of C. verticillata at 5 mg mL-1 showed a value of 122 µM ferrous sulfate equivalents (FSE), while S. trilobata showed 0.93 µM FSE at the same concentration. With respect to cytotoxic assay with murine fibroblast cell line (3T3) only S. trilobata exhibited cytotoxic effects measured by MTT and Sulforhodamine B assays, evidenced by the cell viability value of approximately 16%, in both tests after 24 and 72 hours of exposure of the cells to 5 mg mL-1 of the extract. Comparatively, at 5 mg mL-1 the C. verticillata extract showed cell viability of 142% and 95%, respectively, after 24 hours of cell exposure. On the other hand, both species showed genotoxic profiles evidenced by chromosomal aberrations by Allium cepa bioassay, observed by the higher percentage values of chromosome bridges, chromosome loss, and disturbed anaphase for all concentrations of both extracts than those of the negative control. The results support the characterization of the toxicological profile for both species and create an alert regarding the use of S. trilobata, which should be avoided.

Oxidative stress in patients with type 2 diabetes mellitus treated with metformin / Estresse oxidativo em pacientes com diabetes mellitus tipo 2 em tratamento com metformina

AIMS: To evaluate oxidative stress parameters in patients with type 2 diabetes mellitus treated with metformin, relating these values to its side effects, plasma levels, glycemic control, diabetic complications, lipid profile, and the influence of pharmacotherapeutic follow-up. METHODS: Patients with type 2 diabetes mellitus, on metformin and in pharmacotherapeutic follow-up for four months, were evaluated. The pharmacotherapeutic follow-up consisted in providing information and answering patients' questions about medication and disease. In addition, administration times, dosages, and presence or absence of side effects related to the use of metformin were verified. Glycemic and lipid profile, oxidative stress (superoxide dismutase and malondialdehyde) and plasma metformin were evaluated. Pearson's correlation and Spearman's correlation were performed to evaluate the relationship between the variables at the beginning of the study. The independent t-test and Mann-Whitney U test were used to assess the difference between the groups with and without diabetic complications. The range of values between the beginning and end of the study was evaluated using Student's t-test or Wilcoxon U test. The significance level was set at 5%. RESULTS: The initial sample consisted of 49 patients aged 59±9 years with a body mass index of 29.8±5.1 kg/m2 , who have had diabetes for a median time of 36 months (interquartile range of 1-240) and have been on metformin for a median time of 36 months (interquartile range of 1-180). Twenty-five patients left the study between the second and fourth meetings. Malondialdehyde levels differed between before and after pharmacotherapeutic follow-up, being positively correlated with blood glucose, glycohemoglobin, and triglyceride level, and negatively correlated with metformin and superoxide dismutase. Blood glucose, glycohemoglobin, and malondialdehyde levels increased, whereas metformin levels decreased in the group with diabetic complications, and there was a correlation between malondialdehyde and the number of diabetic complications per patient. CONCLUSIONS: In this sample of patients with type 2 diabetes mellitus treated with metformin, oxidative stress was more pronounced in those with poor glycemic control and diabetic complications.

OBJETIVOS: Avaliar parâmetros de estresse oxidativo em pacientes com diabetes mellitus tipo 2 em uso de metformina, relacionando estes valores a seus efeitos adversos, níveis plasmáticos, controle glicêmico, complicações diabéticas, perfil lipídico, e a influência do acompanhamento farmacoterapêutico. MÉTODOS: Foram avaliados pacientes com diabetes mellitus tipo 2, em uso de metformina, em acompanhamento farmacoterapêutico por quatro meses. O acompanhamento farmacoterapêutico consistiu na prestação de informações e no esclarecimento de dúvidas dos pacientes sobre a medicação e a doença. Além disto, foram verificados os horários, as doses e a presença ou não de efeitos adversos relacionados ao uso de metformina. Foram avaliados perfil glicêmico e lipídico, estresse oxidativo (superóxido dismutase e malondialdeído) e metformina plasmática. Foram realizados os testes de correlação de Pearson e de Spearman para avaliar as relações entre as variáveis no início do estudo. Para testar a diferença entre os grupos com e sem complicações diabéticas, foram utilizados o t-teste independente ou o teste U de MannWhitney. A gama de valores entre o início e o final do estudo foi avaliada utilizando o teste t de Student ou o teste de Wilcoxon U. Foi adotado um nível de significância de 5%. RESULTADOS: A amostra inicial foi composta por 49 pacientes com idade de 59±9 anos e índice de massa corporal de 29,8±5,1 kg/m2 , com diabetes por uma mediana de tempo de 36 (intervalo interquartil 1-240) meses e em uso de metformina há uma mediana de 36 (intervalo interquartil 1-180) meses. Vinte e cinco pacientes deixaram o estudo entre a segunda e a quarta reunião. Os níveis de malondialdeído diferiram entre antes e após o acompanhamento farmacoterapêutico, correlacionando-se positivamente com glicemia, glicohemoglobina e triglicerídeos e negativamente com metformina e superóxido dismutase. Encontrou-se elevação da glicemia, glicohemoglobina e malondialdeído, e diminuição da metformina no grupo com complicações diabéticas, e foi identificada correlação entre malondialdeído e o número de complicações diabéticas por paciente. CONCLUSÕES: Nesta amostra de pacientes com diabetes mellitus tipo 2 em tratamento com metformina, o estresse oxidativo foi mais pronunciado nos que apresentavam pior controle glicêmico e complicações diabéticas.

Thirdhand smoke: when the danger is more than you can see or smell / Thirdhand smoke: cuando el peligro va más allá de lo que se ve o se siente / Thirdhand smoke: quando o perigo vai além do que se vê ou sente

Recent discussion has focused on another form of exposure to tobacco - thirdhand smoke (THS) - consisting of residual pollutants from cigarette smoke that remain in environments. The main concern with THS is based on the presence and persistence of many toxic compounds, some specific nitrosamines from tobacco that have carcinogenic activity. Little is known about THS, and few people are aware of its existence and potential health repercussions, thus highlighting the need to shed light on the subject and incorporate it into the public health debate, as was done with passive smoking several years ago. THS is a form of passive smoking, together with secondary or involuntary exposure to cigarette smoke.

Recientemente comenzó a ser discutida otra forma de exposición al tabaco -thirdhand smoke (THS)- que consta de contaminantes residuales de humo de cigarrillo que permanecen en el medio ambiente. La principal preocupación con la THS se basa en la presencia y larga persistencia de muchos compuestos tóxicos, como algunas nitrosaminas específicas que tienen actividad cancerígena. Pocos saben de la existencia de los THS y su impacto preocupante en la salud. Se plantea la necesidad de sacarlo a la luz e incluirlo en las discusiones, como se hizo con el tabaquismo pasivo hace unos años, incluso porque el THS se caracteriza como una forma de tabaquismo pasivo por la exposición secundaria o involuntaria de humo de cigarrillo.

Recentemente, passou a ser discutida mais uma forma de exposição ao tabaco - thirdhand smoke (THS) - que consiste nos poluentes residuais da fumaça de cigarro que permanecem nos ambientes. A principal preocupação com o THS é embasada na presença e longa persistência de muitos compostos tóxicos, algumas nitrosaminas específicas do tabaco que têm atividade carcinogênica. Além de se saber pouco sobre o THS, poucos sabem de sua existência e preocupante repercussão na saúde. Coloca-se em destaque a necessidade de trazê-lo à luz e incluí-lo nas discussões, assim como foi feito com o tabagismo passivo alguns anos atrás, até mesmo porque o THS se caracteriza como uma forma de tabagismo passivo junto à exposição secundária ou involuntária da fumaça de cigarro.

Acompanhamento farmacoterapêutico em pacientes dislipidêmicos de um lar de idosos da cidade de Novo Hamburgo-RS / The pharmacotherapeutic follow-up in dyslipidemic patients of a nursing home in Novo Hamburgo city, state of Rio Grande do Sul, Brazil

INTRODUÇÃO: A partir do último século, observou-se aumento na expectativa de vida e na incidência de patologia na população idosa, principalmente doenças crônicas. OBJETIVO: Avaliar o efeito do acompanhamento farmacoterapêutico (AF) em pacientes dislipidêmicos de um lar de idosos da cidade de Novo Hamburgo, RS. METODOLOGIA: Trata-se de estudo quantitativo, observacional com delineamento longitudinal retrospectivo, que avaliou 50 pacientes idosos residentes de um lar geriátrico (80,2 ± 7,64 anos, 32 mulheres). Foi avaliado o perfil lipídico desses pacientes (colesterol total, triglicerídeos, HDL e LDL) antes e após AF de um ano. A análise dos resultados ocorreu por meio de estatística descritiva e teste t Student ou U de Mann Whitney para amostras pareadas. RESULTADOS: 56% dos pacientes apresentaram alteração no perfil lipídico no início do estudo e, 30% ao final, ocorrendo significativa melhora após o AF. Além disso, os níveis de colesterol total apresentaram diminuição favorável após um ano de acompanhamento (206 ± 53 vs. 180 ± 43 mg/dL; P = 0,009). A maioria dos pacientes que apresentou diagnóstico de dislipidemia utilizava medicamentos há pelo menos três meses para o tratamento dessa patologia (estatinas e fibratos). A maioria desses pacientes utilizava os medicamentos de forma correta. CONCLUSÃO: Conclui-se que os pacientes tiveram melhora no seu perfil lipídico após um ano de acompanhamento.

INTRODUCTION: Since the last century, life expectancy and the incidence of disease in the elderly have increased, especially chronic diseases. OBJECTIVE: This study aims to evaluate the pharmacotherapeutic follow-up(PF) in dyslipidemic patients of a nursing home in Novo Hamburgo city, state of Rio Grande do Sul, Brazil. METHODOLOGY: This is a quantitative, observational study with a longitudinal retrospective design, evaluating 50 elderly patients who live in a nursing home (80.2 ± 7.64 years old, 32 women). We assessed the lipid profile of these patients (total cholesterol, triglycerides, HDL and LDL) before and after one-year PF. The analysis was conducted through descriptive statistics and Student t test or U of Mann Whitney test for paired samples. RESULTS: 56% of the patients presented changes in lipid profile in the beginning of the study and 30% one year later, with significant improvement of the lipid profile after the monitoring. Moreover, total cholesterol levels showed a favorable decrease after a year of monitoring (206 ± 53 vs. 180 ± 43 mg/dL; P = 0.009). Most patients diagnosed with dyslipidemia were using drugs, for at least three months, to treat this pathology (statins and fibrates). The majority of these patients used them correctly. CONCLUSIONS: The patients had significant improvement in their lipid profile after one year of monitoring.

Avaliação do uso de medicamentos em uma unidade pediátrica de um hospital privado do sul do Brasil / Assessment of medication used in a private hospital pediatric unit in south Brazil

A avaliação do uso racional de medicamentos em pediatria é importante, já que este grupo de pacientes traz desafios diários relacionados à administração, posologia e preparação dos medicamentos. Neste estudo, foram analisados 382 prontuários de pacientes de uma unidade pediátrica hospitalar, sendo avaliados o número de medicamentos prescritos, a via de administração, a adequação da dose prescrita e o modo de diluição. A divisão entre sexos foi similar, com uma média de quatro medicamentos prescritos por paciente. A via intravenosa foi a mais utilizada. As classes farmacológicas mais prescritas foram analgésicos e antibacterianos. As principais inadequações de doses foram verificadas com gentamicina, penicilina, carbamazepina e paracetamol. Verificou-se que o procedimento de diluição é realizado com volume fixo e um único tipo de diluente para todos os fármacos, sendo que o volume dos pós não é considerado no ajuste do volume final de reconstituição. Desta forma, percebe-se que a maioria das falhas encontradas poderia ser minimizada mediante a atuação de farmacêuticos disponibilizando informações sobre medicamentos à equipe de saúde.

It is very important to assess the rational use of medicines in pediatrics since this group of patients raises daily challenges in the administration, dosage and preparation of prescribed medication. In this study, the medical records of 382 patients in a Pediatric Unit of a private hospital were analyzed. We assessed the number of medicines prescribed, administration route, dose prescribed and dilution procedure. The numbers of female and male children were similar. An average of 4 medicines was prescribed for each patient. The intravenous route of administration was the most frequently used. The worst errors in the prescribed dose were found for gentamycin, penicillin, carbamazepine and acetaminophen. It was discovered that all hospital dilution procedures were done with a fixed volume of the same diluent for all prescribed drugs and the powder volume was ignored when the final volume of the reconstituted solutions was adjusted. Thus, it is clear that most of the faults found could be minimized by the action of pharmacists providing drug information to the health care team.

Acompanhamento farmacoterapêutico em idosos hipertensos residentes em um lar geriátrico, localizado na Região do Vale dos Sinos, Rio Grande do Sul, Brasil / Pharmacotherapeutic monitoring in hypertensive elderly living in a geriatric home in Vale dos Sinos region, Rio Grande do Sul, Brazil

A hipertensão arterial sistêmica (HAS) é um dos problemas de saúde de maior prevalência, afetando cerca de 600 milhões de pessoas em todo mundo. No Brasil, aproximadamente 65% da população idosa é portadora desta doença. Objetivo: Avaliar a resposta farmacoterapêutica em idosos hipertensos, residentes em um lar geriátrico, após acompanhamento farmacoterapêutico e intervenções farmacêuticas. Metodologia: Trata-se de estudo quantitativo, observacional com delineamento longitudinal retrospectivo. Participaram 31 (62%) idosos do total de 50 indivíduos (acima de 60 anos), de ambos os sexos e com HAS diagnosticada. Avaliaram-se as médias mensais das pressões sistólica, diastólica e pressão arterial média, no período de setembro/2008 a julho/2010. A análise dos resultados ocorreu por meio de estatística descritiva e teste t de Student para amostras pareadas. Resultados: Quanto ao tratamento medicamentoso para HAS, predominou o uso de Inibidores da ECA (71%) e diuréticos tiazídicos (41,9%); 61,3% dos pacientes em estudo fazem tratamento farmacológico em associação de fármacos anti-hipertensivos. Não foram observadas interações medicamentosas clinicamente relevantes entre os fármacos anti-hipertensivos e as demais classes terapêuticas utilizadas pelos idosos. Houve queda nas médias pressóricas, assim como no número de pacientes com pressão arterial alterada. Conclusão: O decréscimo das médias pressóricas pode ser atribuído a diversos fatores e, após o acompanhamento farmacoterapêutico desses pacientes, os níveis de pressão arterial melhoraram.

Relation between CYP2C19 phenotype and genotype in a group of Brazilian volunteers / Relação entre genótipo e fenótipo de CYP2C19 em um grupo de voluntários brasileiros

The CYP2C19 gene presents polymorphism affecting the pharmacokinetics of several drugs of clinical importance. The purpose of this study was to investigate the correlation between CYP2C19 genotype and metabolic phenotype in a group of 38 Brazilian volunteers, evaluating the phenotype prediction capacity of the genotyping procedure. For CYP2C19 phenotyping, omeprazole was used as the probe drug, using the hydroxylation metabolic ratio as the phenotypic indicator. Venous blood samples were drawn before and three hours after an oral administration of 20 mg omeprazole. The plasma concentrations of omeprazole and hydroxy-omeprazole were determined by high performance liquid chromatography. The genotyping assay was carried out using a Real-Time-PCR-based assay, identifying the alleles *1 (completely functional), *2, *3 and *4 (null). The phenotyping procedure estimated the presence of 4 poor, 34 extensive and 1 ultra-extensive metabolizer. The genotyping identified 4 poor, 23 extensive and 11 intensive metabolizers. The groups of volunteers classified according to the number of active alleles of CYP2C19 had significant differences in the metabolic ratios of omeprazole hydroxylation. However, volunteers exhibiting the same number of active alleles presented different phenotypes. Therefore, the phenotyping of CYP2C19 is a more promising alternative to dose individualization of CYP2C19 substrate drugs.

O gene CYP2C19 apresenta polimorfismo genético, com impacto importante na farmacocinética de diversos fármacos de importância clínica. O objetivo deste estudo foi avaliar a correlação entre genótipo e fenótipo de CYP2C19 em um grupo de 38 voluntários brasileiros, avaliando a capacidade de predição do fenótipo a partir de testes de genotipagem. Para a fenotipagem, utilizou-se omeprazol (OME) como fármaco-sonda para CYP2C19, empregando sua razão metabólica de hidroxilação como indicador fenotípico. Amostras de sangue foram coletadas antes e três horas após a administração oral de 20mg do fármaco. As concentrações plasmáticas de OME e seu metabólito foram determinadas por cromatografia líquida de alta eficiência. A genotipagem de CYP2C19 foi realizada através de ensaio baseado na reação em cadeia da polimerase em tempo real, identificando os alelos *1 (completamente funcional),*2 e *3 (nulos). Pela fenotipagem foi possível estimar a presença de 3 metabolizadores lentos, 34 rápidos e 1 ultra-rápido; enquanto pela genotipagem foi determinada a presença de 4 metabolizadores lentos, 23 rápidos e 11 intermediários. Os grupos de voluntários classificados de acordo com o número de alelos ativos apresentaram diferenças significativas entre as razões metabólicas de hidroxilação de omeprazol. Entretanto, indivíduos com o mesmo genótipo apresentaram fenótipos diferentes. Desta forma, a fenotipagem apresenta-se como alternativa mais promissora para a individualização das doses de fármacos substratos de CYP2C19.